DNA 電気泳動像の撮影: LAS 500

Introduction

エチジウムブロマイド (ethidium bromide; EtBr) は DNA に結合する有機化合物である。DNA に結合した EtBr に紫外線を照射すると、590 nm の赤橙色の蛍光を発する。この蛍光を検出・撮影することで、DNA を可視化・定量することができる。

Protocol

  1. LAS 500 の画面左に USB メモリを挿す。本体右側面の電源をオンにする。
  2. 画面左下に「Not ready」と表示される。数分後に「Ready」となれば撮影可能。
  3. 本体前面の扉を開け、オレンジ色のフィルターを挿入する。
  4. 黒いプラスチックトレイの中央に、アガロースゲルを密着させて置く。
  5. トレイを本体に設置して扉を閉める。
  6. 画面上段の「Auto」をオンにする。
  7. 「Fluorescence」の「Automatic filter detection disabled」をオフにする。
  8. 「Fluorescence」の「Start exposure」を押す。
  9. 撮影が始まり、数十秒で写真が表示される。
  10. 写真を確認し、「Save」を押す。
  11. 画面右上のファイル保存場所を「USB」にして「Save」を押す。
  12. ファイルが保存されると自動的に最初の画面に戻る。
  13. フィルター、トレイを片づけ、電源をオフにする。
  14. アガロースゲルは可燃ゴミとして処分する。

撮影した写真は USB メモリの「LAS 500 images」フォルダに保存される。
ファイル名は「日付_時間_Fl.tif」（例：20200624_113019_Fl.tif）。

Examples

DNA gel electrophoresis
Fig 1 (Nihashi 2019)

References

Nihashi Y, Ono T, Kagami H, Takaya T*. Toll-like receptor ligand-dependent inflammatory responses in chick skeletal muscle myoblasts. Dev Comp Immunol. 2019; 91: 115-122.