Lipofection: Viofectin

Materials

Protocol

Cell Plate Cell No. Medium Opti-MEM Viofectin DNA R-Luc
C2C12 12-well 15,000 700 ul 60 ul 4 ul 2.00 ug SV40
3T3-L1 24-well 20,000 300 ul 30 ul 2 ul 1.00 ug CMV
A-10 12-well 30,000 700 ul 60 ul 1 ul 0.25 ug CMV
RAW264.7 24-well 20,000 300 ul 30 ul 1 ul 0.25 ug TK
  1. 1.5 ml チューブに Opti-MEM を入れる。
  2. Viofectin を加えてタッピングし、RT, 5 min。
  3. プラスミド DNA を加えてタッピングし、RT, 20 min。
  4. 培養中の培養液に上記の混合液を加える。ピペッティングや撹拌はしない。
  5. CO2 インキュベーション, 37°C。
  6. 6 h 後に培養液を交換する。
    培地交換は翌朝でも良いが、Viofectin に毒性があるので、死細胞が多くなることもある。