Introduction
TMRM (tetramethylrhodamine methlester, テトラメチルローダミンメチルエステル) は、活動性のミトコンドリアに蓄積する、細胞浸透性の蛍光色素である。健全に機能しているミトコンドリアを持つ生細胞を染色することができる。
Materials
- 10 mM TMRM stock (25 mg TMRM [Wako, 203-18041] in 5 ml DMSO), -20°C
- 培養液
- PBS(-), 4°C
Protocol
- 1 ul の TMRM を 200 ul の培養液に加え、50 uM TMRM 溶液を調製する。
- 50 uM TMRM 溶液を培養液で 1/200 (250 nM) に希釈し、TMRM 染色液を調製する。
- アスピレーターで dish の培養液を除去する。
- TMRM 染色液を dish に加える。
- CO2 インキュベーション, 37°C, 30 min。
- アスピレーターで TMRM 染色液を除去する。
- PBS(-) で wash, 3回。
- PBS(-) に細胞が浸かっている状態で蛍光観察する。